CY5.5-Antioxidase,CY5.5-抗氧化酶的反应机理
CY5.5-酶(Antioxidase)是一种将近红外荧光染料Cyanine5.5(CY5.5)共价标记于酶类蛋白上的功能性荧光探针。酶如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(catalase)等,在清除自由基、保护细胞免受氧化损伤中发挥重要作用。CY5.5的引入使其不仅具备生物活性,还拥有可视化功能,便于体内外的动态监测和定位。
反应机理
标记的化学基础
CY5.5通常以活化形式存在,如CY5.5-NHS酯,其羧酸活性酯能够与蛋白质酶表面暴露的氨基(主要是赖氨酸侧链的ε-氨基)通过亲核取代反应形成稳定的酰胺键,实现染料与酶的共价连接。
酰胺键形成机理
反应过程始于CY5.5-NHS酯中的活性羧酸与蛋白质氨基之间的亲核攻击。赖氨酸的氨基作为亲核试剂攻击NHS酯中的羧酸碳原子,导致N-羟基琥珀酰亚胺离去,形成稳定的酰胺键,完成染料与酶的共价偶联。
空间构象与功能保持
标记过程中,Cy5.5大分子通常通过灵活的连接臂与酶结合,尽量避免活性位点的遮挡或构象变化,保持酶的催化功能。结合位点的选择多靠赖氨酸残基的表面暴露和空间可达性。
反应选择性与调控
反应条件(pH、温度、染料与酶的摩尔比)调控能提高偶联效率并限制非特异性标记,保证酶活性和荧光性能共存。
荧光信号传导机理
Cy5.5标记后,酶在激发波长(约675 nm)激发下发射近红外荧光(约695-720 nm),通过荧光成像实现酶的动态追踪和定位。
生物相容性与稳定性
CY5.5-酶保持良好的水溶性和生物相容性,标记稳定,适合于细胞、组织及体内成像,辅助研究氧化应激相关生理病理过程。
产品名称:CY5.5-Antioxidase,CY5.5-抗氧化酶
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:齐岳生物
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc返回搜狐,查看更多